裴端卿团队在研究中如何克服传统化学诱导法效率低、机理不清的难题？

问题描述

精选答案

通过创新小分子组合筛选体系，结合动态监测与多组学分析，系统性解析重编程机制并提升转化效率。

关键技术突破与实施路径

传统方法缺陷	裴端卿团队解决方案
化学诱导效率仅5-10%	建立高通量筛选平台，优化小分子组合，效率提升至30%以上
重编程机理模糊	整合单细胞测序与表观遗传分析，定位关键信号通路（如Wnt/β-catenin）
细胞状态监测滞后	开发实时荧光报告系统，动态追踪细胞命运转变过程
成分复杂导致结果不稳定	采用模块化诱导策略，分阶段调控代谢与表观遗传网络

核心突破点

1. 小分子组合创新：通过筛选3000余种化合物，锁定VPA、CHIR99021等核心分子，协同激活多能性基因表达。
2. 动态重编程模型：构建双荧光标记体系，实时观察Oct4与Nanog激活时序，揭示“代谢-表观遗传-信号通路”级联反应。
3. 跨尺度机制解析：联合ATAC-seq、RNA-seq和代谢组学数据，证明糖酵解增强驱动染色质开放性改变。

实验验证数据

• 小鼠成纤维细胞转化周期由21天缩短至8天
• 单细胞分辨率显示关键过渡态细胞占比从1.2%增至15.6%
• DNA甲基化重编程效率提高4.3倍

应用拓展
建立标准化诱导流程数据库（涵盖12种体细胞类型），开发智能预测算法，实现不同物种细胞命运转化路径的可控设计。